Kinesin-1 is a plus-end directed microtubule motor composed of two kinesin heavy chains (KHC) and two kinesin light chains (KLC). Autoinhibition is an important regulatory mechanism for Kinesin-1, however, the molecular details remain unclear. To unveil the regulatory mechanism of Kinesin-1, I performed in vitro TIRF (Total internal reflection fluorescence) assay. I identified that the KLC strongly inhibits the kinesin-microtubule interaction via an independent mechanism from the well-known tail-motor interaction within KHC. Kinesin cargo-adaptor proteins that bind to the KLC activated processive movement of the kinesin tetramer but the landing rate of these activated complexes remained relatively low. The addition of MAP7, which specifically binds to the KHC, strongly enhanced the activated motor motility. Our results suggest that Kinesin-1 is regulated by a two-factor mechanism comprised of intramolecular regulation, as well as intermolecular kinesin-adaptor and kinesin-MAP interactions. [1] Chiba, K., Ori-McKenney, K. M., Niwa, S., & McKenney, R. J. (2022). Reconstitution of a Synergistic Kinesin-1 Activation Mechanism. Cell Rep, in press. ―128―生体模倣システム（MPS）は，動物代替の有力な候補である．現在，MPS内の細胞機能のモニタリング，特に細胞機能の空間分布の評価を行うセンサの開発が求められている．そこで本研究では，MPSの評価用の新たなセンサとして，走査型プローブ顕微鏡（SPM）によるMPSの評価法を検討した．血管のMPSを作製し，透過性，表面形状を，それぞれ走査型電気化学顕微鏡（SECM），走査型イオンコンダクタンス顕微鏡（SICM）を用いて，画像化できることを実証した[1]．さらに，血管を接続した細胞凝集塊，がんオルガノイドを対象に，経血管的にミトコンドリア膜の脱分極剤，抗がん剤を投与した際の酸素消費の変化をリアルタイムに検出できることを示した．本システムをさらに，移植膵島の血管形成過程の再現に利用可能な足掛かりを得た． 本研究で開発した分析システムは，MPSの新たな評価ツールとして期待できる． 参考文献 [1]Y. Nashimoto*, A. Minori†, R. Fujii†, et al., Adv. Healthcare Mater., 10, 2101186 (2021).*corresponding author, †equal contribution.梨本裕司（新領域創成研究部／生命・環境） 千葉杏子／生命・環境 走査型プローブ顕微鏡を利用した生体模倣システム分析技術の開発 In vitro reconstitution of Kinesin-1 activation
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